【摘 要】
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目的 通过回输表达供体部分MHCⅡDRβ分子的自体骨髓细胞,观察受体对供体肝移植物的排斥情况.方法 将供体猪MHCⅡDRβ分子进行克隆,并通过基因重组技术将其克隆到反转录病毒
【机 构】
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上海,南京医科大学第一附属医院肝脏科
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目的 通过回输表达供体部分MHCⅡDRβ分子的自体骨髓细胞,观察受体对供体肝移植物的排斥情况.方法 将供体猪MHCⅡDRβ分子进行克隆,并通过基因重组技术将其克隆到反转录病毒载体pLNCX2上,经过细胞学操作获得有感染性的病毒颗粒;体外感染受体骨髓细胞,并将感染后的骨髓细胞回输给受体,随后采用Nothern杂交和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法检测供体基因的表达,并通过MLR反应检测受体对供体的免疫排异反应;之后进行全肝脏移植实验,观测移植物的排异反应.结果 实验组6头受体全部有外源基因的表达;进行回输后受体免疫功能都基本回复,MLR检测显示受体对供体的反应性明显下降,而对第三方的有较强的排异反应;进行移植后实验组中的5头移植物存活良好,而对照组于12～18周先后死亡,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 猪受体在接受供体肝脏移植前,如果用供体的部分MHCⅡDRβ分子进行修饰并在体内进行表达,可以明显延长移植物的存活时间.
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