【摘 要】
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目的:探讨槐果碱对肝癌细胞SMMC-7721和肝细胞LO2增殖、凋亡及线粒体膜电位的影响及其机制.方法:选取SMMC-7721和LO2,利用不同浓度梯度的槐果碱处理SMMC-7721,根据IC50筛选出
【机 构】
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江苏大学附属昆山医院,江苏 昆山,215300;江苏大学医学院,江苏镇江,212000;昆山市花桥人民医院,江苏 昆山,215300
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目的:探讨槐果碱对肝癌细胞SMMC-7721和肝细胞LO2增殖、凋亡及线粒体膜电位的影响及其机制.方法:选取SMMC-7721和LO2,利用不同浓度梯度的槐果碱处理SMMC-7721,根据IC50筛选出两个适宜的浓度同时处理SMMC-7721和LO2细胞,镜下观察,并利用MTT实验、流式细胞凋亡实验及线粒体膜电位检测分别分析增殖、凋亡及线粒体膜电位改变情况;利用Western blot法检测凋亡相关蛋白表达水平.结果:槐果碱作用SMMC-7721的IC50为536.3 mg/L(95％CI:412.7,697.0).选取500 mg/L及1000 mg/L处理细胞后,细胞分布密度降低并出现不同程度的细胞皱缩.MTT结果显示随着药物浓度的升高,两种细胞OD值均明显下降(P＜0.001);而同浓度下,增殖能力比较,差异无统计学意义(P＞0.05).槐果碱作用后总凋亡率均随着浓度的升高而增加,但高浓度下对肝细胞的促凋亡作用明显高于肝癌细胞(P＜0.05);线粒体膜电位水平均随着浓度的升高而降低(P＜0.05);随着槐果碱浓度的升高,两种细胞内Bcl-2水平均减少,而Bax及Cleaved-Caspase-3蛋白水平均有所升高.结论:槐果碱通过上调肝癌细胞SMMC-7721和肝细胞LO2细胞内Bax和Cleaved-Caspase-3表达并抑制Bcl-2,抑制其增殖,降低线粒体膜电位水平,并促进细胞凋亡,提示槐果碱在抑制肝癌生长的同时有着不可避免的肝细胞损伤等毒副作用.
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