【摘 要】
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目的 探讨微小RNA-29a(miR-29a)对Dicer基因敲除小鼠心脏重构的影响.方法 将Myh6-Dicer ERT/Dicerloxp/loxp小鼠随机分为正常对照组、模型组、miR-29a过表达(miR-29a agomir)
【机 构】
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610081 四川 成都,成都大学附属医院急诊科
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目的 探讨微小RNA-29a(miR-29a)对Dicer基因敲除小鼠心脏重构的影响.方法 将Myh6-Dicer ERT/Dicerloxp/loxp小鼠随机分为正常对照组、模型组、miR-29a过表达(miR-29a agomir)组和miR-29a阴性对照(miR-29a NC)组,每组12只.除正常对照组腹腔注射玉米油外,其余各组均经腹腔注射他莫昔酚(TMX)溶液诱导建立心肌特异性Dicer基因敲除心力衰竭(HF)模型,miR-29a agomir组尾静脉注射miR-29a agomir 6 mg/kg,连续注射3 d,1次/d,miR-29a NC组尾静脉注射miR-29a NC 6 mg/kg,连续注射3 d,1次/d.末次给药1周后,小动物超声多普勒血流仪检测左心室功能,记录左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS);酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清脑钠肽(BNP)及N端脑钠肽前体(NT-proBNP);苏木精-伊红(HE)、马森(Masson)染色及天狼猩红染色观察小鼠心肌组织形态;实时荧光定量PCR检测心肌组织miR-29a表达水平;蛋白免疫印迹法检测小鼠心肌组织纤维化指标Ⅰ型胶原蛋白(collagen I)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达.结果 与模型组比较,miR-29a agomir组小鼠心肌病理损伤减轻,LVEDD、LVESD、血清BNP、NT-proBNP水平及心肌组织Ⅰ型胶原蛋白、MMP-9蛋白表达降低[LVEDD(mm):5.78±0.70 vs.8.68±0.61,LVESD(mm):3.53±0.74 vs.5.92±0.58,BNP(pg/mL):168.89±30.16vs.817.14±84.05,NT-proBNP(pg/mL):193.02±33.07vs.990.36±96.18,Ⅰ型胶原蛋白蛋白:0.73±0.09 vs.1.26±0.11,MMP-9蛋白:0.77±0.12 vs.1.29±0.13,均P<0.05],LVEF、FS及心肌组织miR-29a表达水平升高[LVEF(％):78.86±3.93 vs.62.11±3.01,FS(％):45.62±4.01 vs.27.87±2.63,miR-29a:0.92±0.16 vs.0.14±0.05,均P<0.05].结论 miR-29a可抑制心肌特异性Dicer基因敲除HF小鼠的心肌纤维化,减轻心室重构,改善心脏功能.
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