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研究了以茶蛋白为原料制备高F值低聚肽过程中的酶解工艺,采用两步定向酶切的方式,探讨合适的蛋白酶种类,并通过单因素试验考察相关工艺条件对酶切效果的影响。结果表明:碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶联用对茶蛋白的水解效果较好;一级定向酶切的最适工艺条件为:底物浓度5%、加酶量(E/S)4%、反应液pH 9.0、反应温度50℃、反应时间3h,此条件下茶蛋白的水解度达到36.02%;二级定向酶切的最适工艺条件为:加酶量(w/v)0.2%、反应液pH值6.5、反应温度55℃、反应时间2h,此条件下水解液的OD220/OD260值达到2.53。该试验为后续水解液分离纯化制备高F值低聚肽产品奠定了基础。