目的 探讨通过悬浮培养法富集乙醛脱氢酶1(ALDH-1)高表达的头颈部鳞癌肿瘤细胞的可行性,鉴定富集的细胞是否具有肿瘤干细胞特性.方法 将头颈肿瘤细胞株接种于低黏附平板,在10 ng/ml重组表皮生长因子和10 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养基中形成细胞微球,通过ALDEFLUOR方法对ALDH-1的表达水平进行半定量分析,采用流式细胞术分选出ALDH-1高表达细胞,分析其生物学特性.结果 UD-SCC1、UT-SCC22、UM-SCC11B、UT-SCC9和UT-SCC24A细胞在无血清培养液中悬浮培养5～1Od后均能形成细胞微球.在UD-SCC1、UT-SCC22、UM-SCC11B、UT-SCC9和UT-SCC24A细胞株细胞微球来源的细胞(SDC)中,ALDH-1的表达水平均高于其贴壁生长细胞(均P＜0.05).ALDH-1高表达和低表达细胞形成的克隆细胞数分别为(197±47)个和(33±16)个(P＜0.01).单个ALDH-1高表达和低表达UT-SCC9细胞的克隆形成率分别为17.1％和0.7％,差异有统计学意义(P＜0.05);单个ALDH-1高表达和低表达UD-SCC1细胞的克隆形成率分别为19.3％和0,差异有统计学意义(P＜0.01).UD-SCC1、UT-SCC22、UM-SCC11B、UT-SCC9和UT-SCC24A细胞的SDC侵袭力均高于其贴壁细胞(均P＜0.05).在UD-SCC1、UT-SCC22、UM-SCC11B、UT-SCC9和UT-SCC24A细胞的SDC中,Nanog、Sox2和Oct-4 mRNA的表达水平均高于其贴壁细胞(均P＜0.05).UD-SCC1和UT-SCC24A细胞的SDC中,低活性氧簇(ROS)水平细胞比例分别为(26.3±4.9)％和(72.1±6.1)％,均高于UD-SCC1和UT-SCC24A细胞的贴壁细胞中低ROS水平细胞比例[分别为(8.6±1.7)％和(23.7±7.5)％,均P＜0.05].结论 悬浮培养法可有效富集头颈部鳞癌细胞系内的ALDH-1高表达细胞,富集后的细胞具有肿瘤干细胞特性.
悬浮培养法富集头颈部鳞癌肿瘤干细胞及其功能研究
【摘 要】
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目的 探讨通过悬浮培养法富集乙醛脱氢酶1(ALDH-1)高表达的头颈部鳞癌肿瘤细胞的可行性,鉴定富集的细胞是否具有肿瘤干细胞特性.方法 将头颈肿瘤细胞株接种于低黏附平板,在10 ng/ml重组表皮生长因子和10 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养基中形成细胞微球,通过ALDEFLUOR方法对ALDH-1的表达水平进行半定量分析,采用流式细胞术分选出ALDH-1高表达细胞,分析其生物学特性
【机 构】
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(310022杭州,浙江省肿瘤医院头颈外科),(310022杭州,浙江省肿瘤医院头颈外科),(310022杭州,浙江省肿瘤医院头颈外科)
【出 处】
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中华肿瘤杂志
【发表日期】
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2014年36期
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