观察宫内移植骨髓间充质干细胞对脊柱裂子鼠神经细胞凋亡及p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。
方法将30只妊娠大鼠随机根据随机数字法分为对照组、脊柱裂组(建立脊柱裂模型)、移植组(建立脊柱裂模型+骨髓间充质干细胞移植),每组10只,造模成功后,在每组取16只子鼠进行研究。采用原位缺口末端标记法(TUNEL)法测定脊髓细胞凋亡。采用蛋白质印迹法(Western blot)和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定子鼠脊髓半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)、磷酸化-核因子-κB(p-NF-κB)、磷酸化-p38(p-p38)、p38、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)水平。应用SPSS 20.0统计软件分析。
结果与对照组[(6.47±0.62)个]比较,脊柱裂组和移植组子鼠脊髓凋亡细胞数明显升高[(23.14±2.36)、(13.62±1.04)个,t=27.327、14.425, P<0.05],与脊柱裂组比较,移植组子鼠脊髓凋亡细胞数降低(t=12.648,P<0.05)。对照组比较,脊柱裂组和移植组子鼠脊髓Caspase-3、p-NF-κB、p-p38、bax水平升高(0.76±0.12、0.82±0.13、0.92±0.14、0.93±0.14;0.41±0.08、0.54±0.08、0.53±0.11、0.65±0.12,t=22.143, 11.362;19.530, 7.363;18.942, 8.251;16.438, 8.261,P<0.05),bcl-2水平明显降低(0.24±0.08、0.49±0.10,t=20.084、9.214,P<0.05);与脊柱裂组比较,移植组子鼠脊髓Caspase-3、p-NF-κB、p-p38、bax mRNA水平明显降低(1.51±0.24、1.84±0.23、1.83±0.25、2.13±0.18,t=28.536, 13.254; 30.657, 15.326; 37.526, 16.426; 28.536, 15.426,P<0.05),bcl-2 mRNA水平明显升高(0.54±0.08,t=46.526,P<0.05)。
结论宫内移植骨髓间充质干细胞可能通过抑制p38 MAPK信号通路降低脊柱裂子鼠神经细胞凋亡。