探讨红景天苷对体外培养的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤的影响。
方法实验研究。应用H2O2诱导HLEC建立氧化损伤模型，观察红景天苷对其产生的作用。对数生长期的HLEC分别加入不同浓度(0、10、30、50、100、200 μmol/L)的红景天苷干预24 h后，运用细胞计数试剂盒法检测各组HLEC增殖活力。实验分为5组：空白对照组、H2O2损伤组、红景天苷低剂量组(30 μmol/L红景天苷＋ H2O2组)、红景天苷中剂量组(50 μmol/L红景天苷＋ H2O2组)、红景天苷高剂量组(100 μmol/L红景天苷＋ H2O2组)。采用Hoechst 33258染色和流式细胞仪检测细胞凋亡；RT–PCR法检测细胞内B细胞淋巴瘤–2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病–2基因(Bcl–2)及半胱氨酸蛋白酶3(Caspase–3)基因的表达。单因素方差分析用于组间均数的多重比较，进一步组间两两比较采用LSD–t检验。
结果细胞计数试剂盒法结果显示，当H2O2的浓度为200 μmol/L时，HLEC的生存抑制率为49.56%±7.07%，接近于细胞生存的半数抑制率(IC50)。因此，选择200 μmol/L作为H2O2后续实验浓度。不同浓度红景天苷对细胞活性均无抑制作用，红景天苷(10 μmol/L、30 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L)干预细胞24 h后，细胞存活率分别为100.24%±2.07%、101.18%±2.14%、101.32%±2.48%、101.76%±1.93%、99.28%±1.74%，与空白对照组99.84%±2.21%相比，差异均无统计学意义(组间比较F＝1.044，P＝0.415；两两比较P>0.05)。Hoechst 33258染色可见H2O2损伤组有较多HLEC胞核呈致密浓染(凋亡小体)，红景天苷干预组HLEC胞核浓染状况明显减轻。流式细胞仪结果显示空白对照组HLEC凋亡率为2.26%±0.29%，H2O2损伤组HLEC凋亡率为44.56%±4.28%，经30、50、100 μmol/L红景天苷处理后，HLEC凋亡率分别降为31.52%±3.05%、24.06%±4.25%和17.16%±2.75%，5个组间细胞凋亡率的差异具有统计学意义，且红景天苷浓度越高，HLEC凋亡率越低(F＝117.082，P<0.01，两两比较P值均﹤0.01)。与空白对照组相比，H2O2损伤组Bax和Caspase–3的表达明显增高，Bcl–2的表达明显降低，差异有统计学意义(P值均﹤0.01)。与H2O2损伤组相比，低、中、高剂量红景天苷组Bcl–2基因表达均上调，Bax和Caspase–3基因表达均下调，其中，高剂量组Bcl–2上调及Bax、Caspase–3下调的更为明显。各组之间差异有统计学意义(Bax：F＝493.554，P<0.01；Bcl–2：F＝827.820，P<0.01；Caspase–3：F＝537.237，P<0.01)。
结论红景天苷对发生氧化损伤的HLEC具有保护作用，能够抑制HLEC凋亡。(中华眼科杂志，2015，51：130–135)