【摘 要】
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目的研究人类非肌肉型肌球蛋白重链9(MYH9)对人食管癌细胞系EC109发生上皮间质转化(EMT)及其肿瘤干细胞特性的影响。方法通过MYH9小干扰RNA转染EC109细胞,设置阴性对照组(NC)
【机 构】
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广东医科大学附属深圳市第六人民医院胸外科; 华中科技大学同济医学院附属协和医院胸外科; 武汉大学动物实验中心;
【基金项目】
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深圳市卫生计生委科研基金资助项目[No.(2013)191号];湖北省科技厅科技条件资源开发项目(湖北省急危重症医学动物模型共享实验平台)(No.2015BCE099)
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目的研究人类非肌肉型肌球蛋白重链9(MYH9)对人食管癌细胞系EC109发生上皮间质转化(EMT)及其肿瘤干细胞特性的影响。方法通过MYH9小干扰RNA转染EC109细胞,设置阴性对照组(NC)和转染组(siMYH9)。采用RT-PCR、Western blot及免疫荧光技术检测转染后EC109细胞中MYH9蛋白、EMT表型蛋白(E-cad、ZO-1、Vimentin)及肿瘤干细胞标志蛋白(CD133、CD44、ALDH1、Lgr5)的表达,利用细胞增殖实验(CCK8)及Transwell实验分别检测MYH9沉默对细胞增殖及迁移能力的影响,借助细胞成球培养检测MYH9沉默对细胞成球能力的影响。结果 si-MYH9可明显沉默EC109细胞中MYH9蛋白的表达(P<0.05)。沉默MYH9蛋白表达可显著抑制EC109细胞增殖及迁移能力(均P<0.05),同时伴有上皮表型蛋白E-cad及ZO-1表达升高(均P<0.05),间质表型蛋白Vimentin表达降低(P<0.05);沉默MYH9蛋白表达还可抑制EC109形成细胞球,同时伴有肿瘤干细胞标志蛋白(CD133、CD44、ALDH1、Lgr5)的表达降低(均P<0.05)。结论沉默MYH9蛋白表达可抑制食管癌细胞的增殖及迁移能力,抑制细胞发生EMT转化,减弱食管癌细胞的肿瘤干细胞特性。
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