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目的 探讨血清Ⅱ型高尔基体膜蛋白(Golph2)在肝癌诊断中的价值.方法 应用逆转录聚合酶链反应技术,从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列,聚合酶链反应回复突变制备全长完整基因(1206 bp),将其插入原核表达载体pET-21、转化大肠杆菌DH5α,应用异丙基硫代β-D-半乳糖苷诱导其表达,镍柱亲和层析纯化,并经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定.用纯化的蛋白质免疫家兔,制备多克隆抗血清.建立Westem blot鉴定重组蛋白和抗血清特异性,建立双抗体夹心酶联免疫吸附法测定150例肝癌、120例其他肝病、200名健康体检者血清Golph2水平.均值比较采用ONO-WAY ANOVA法. 结果从肝癌细胞中调取的基因,出现2个基因置换突变和1个碱基缺失突变,经回复突变,获得与NM 177937完全一致的序列.经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Westem blot证实,重组Golph2与预期结果一致.抗血清能够特异地识别相对分子质量为5.2×104的重组蛋白质和7.3×104的血清蛋白质,与预期结果一致.建立的酶联免疫吸附试验方法检测肝癌、其他肝病患者、对照组血清Golph2,其吸光度值均数相差显著.以吸光度值≥0.40为阈值,其敏感度和特异性分别为44.5%和82.0%.结论 Golph2在各组人群中均有表达,在肝癌组最高,在肝癌诊断中有一定价值,但特异性和敏感度不高。