人miR-16真核表达载体的构建与鉴定

来源 :医学分子生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：curarchy

【摘要】

：

目的构建人miR-16真核表达载体，为研究其基因表达调控机制建立实验基础。方法从人类基因组DNA中扩增miR．16的前体序列，引入酶切位点和polyT转录终止序列，酶切后插入siRNA表达载体

【作者】

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张小勇余冰倪明陈姗姗吕婷婷江敏杨银柯陆蒙吉杨

【机构】

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华中科技大学同济医学院病原生物学系微生物室,华中科技大学同济医院感染科,华中科技大学同济医院临床免疫室

【出处】

：

医学分子生物学杂志

【发表日期】

：

2008年1期

【关键词】

：

基因的表达与调控 MICRORNA miR-16 报告质粒 expression vector microRNA miR-16 report plasmi

【基金项目】

：

湖北省科技攻关项目（No.2006AA301C22）

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目的构建人miR-16真核表达载体，为研究其基因表达调控机制建立实验基础。方法从人类基因组DNA中扩增miR．16的前体序列，引入酶切位点和polyT转录终止序列，酶切后插入siRNA表达载体pSuper中，构建miR．16真核表达载体pmiR-16，然后进行酶切和测序鉴定；同时构建含miR-16完全互补序列及乙肝表面抗原HBsAg的报告质粒pXF3H-HBs。将pmiR-16与pXF3H—HBs共转染肝癌细胞系HepG2，通过HBsAgELISA检测试剂盒检测表达产物HBsAg的改变，鉴定真核表达载体p

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