毕赤酵母Mut^+和Mut^s重组子表达植酸酶基因及其表达物的酶学性质比较

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将本实验室已成功构建的植酸酶基因表达载体pPIC9K—phyA酶切线性化后,通过原生质体法整合到巴氏毕赤酵#(Pichiapastoris)GSll5茵株细胞中,利用测定酶活、观察转化子在M/V1和MD平板上的生长情况以及PCR茵落鉴定。筛选出表型为甲醇利用缓慢型的重组子(His^+Mut^s)。在相同培养条件下比较甲醇利用缓慢型的重组子和Mut^+重组子在表达植酸酶方面的异同。实验结果表明,诱导表达48h后,Mut^+和Mut^s重组子表达的产物在SDS—PAGE胶上都出现了清晰的目的带。酶学性质测定表
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