大鼠睾丸GABAA受体β3t拼接变异体在CHO细胞中的异源表达

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目的:研究大鼠睾丸GABAA受体β3t拼接变异体特有5端的特性以及可能的细胞内定位作用.方法:将β3t拼接变异体的全长Cdna克隆到真核表达载体Pegfp-N1和Pegfp-C1中,用磷酸钙共沉淀方法转染CHO细胞,表达后用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察分析,并用ConATexa s-Red标记转染后的细胞,进一步研究其在胞内的定位分布情况.结果:大鼠睾丸GABAA受体β3t拼接变异体在CHO细胞中表达时呈现两种表达类型,但均不能定位到细胞膜上,而大鼠脑β3亚基能定位分布到细胞膜上.ConA标记的结果显示β3t拼接变异体滞留在内质网上.结论:大鼠睾丸GABAA受体β3t拼接变异体N端的25aa序列中可能存在内质网滞留信号.
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