【摘 要】
：
玉米(Zea mays)秸秆作为牛羊等家畜的主要饲料来源,其中含有大量的纤维素,外源纤维二糖水解酶(cellobiohydrolase,CBH)可促进纤维素在青贮过程中的降解.乳酸菌(Lactococcus lactis)作为益生菌,可提高青贮饲料的品质.本研究粗提黄牛(Bos taurus domestica)瘤胃微生物混合DNA,以其为模板扩增cbh基因并克隆至食品级载体pMG36e,构建分泌型表达载体pMG36e::CBH;将其导入乳酸菌NZ9000中,利用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitr
【机 构】
：
甘肃农业大学动物医学院,兰州730070;北京市畜牧总站,北京100107;甘肃省科学院生物研究所甘肃省微生物资源开发利用重点实验室/厌氧微生物中心,兰州730000
论文部分内容阅读
玉米(Zea mays)秸秆作为牛羊等家畜的主要饲料来源,其中含有大量的纤维素,外源纤维二糖水解酶(cellobiohydrolase,CBH)可促进纤维素在青贮过程中的降解.乳酸菌(Lactococcus lactis)作为益生菌,可提高青贮饲料的品质.本研究粗提黄牛(Bos taurus domestica)瘤胃微生物混合DNA,以其为模板扩增cbh基因并克隆至食品级载体pMG36e,构建分泌型表达载体pMG36e::CBH;将其导入乳酸菌NZ9000中,利用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法测定重组纤维二糖水解酶的酶活,并对重组酶的酶学性质进行分析.结果显示,从牛瘤胃中克隆获得约1600 bp的重组酶序列,其编码蛋白分子量约为56 kD,滤纸酶活为(2.2181±0.8343)U/mL,外切葡聚糖酶的酶活为(10.4992±1.1135)U/mL;重组酶对再生无定型纤维素(regenerated amorphous cellulose,RAC)的特异性最高,微晶纤维素次之,对滤纸和脱脂棉的特异性较低,而对羧甲基纤维素钠(CMC-Na)几乎没有活性;重组纤维二糖水解酶的最适pH为6,最适温度为60℃;1 mmol/L Mn2+、Zn2+、Fe2+、Cu2+、Co2+和1％Tween-20对重组CBH的酶活有促进作用,1 mmol/L Ba2+和Hg2+几乎对酶活无影响,1 mmol/L K+、Mg2+和EDTA对酶活有抑制作用,5 mmol/L Mn2+、Fe2+、Ca2+、Cu2+、Co2+对酶活有促进作用,10％Tween-20和5 mmol/L Zn2+、Ba2+、Hg2+、K+、Mg2+和EDTA对酶活有抑制作用.本研究构建的牛瘤胃微生物cbh基因的重组乳酸菌,有利于促进青贮过程中秸秆纤维素酶解及提高青贮饲料的营养价值.
其他文献
随着设施温室高附加值蔬菜作物的连年栽培,土传病害问题愈发突出,熏蒸剂也因此得以更广泛的应用.但鉴于熏蒸剂的广谱性,在杀死有害生物的同时,不可避免地对非靶标生物产生一定的影响.本研究采用qPCR技术、选择性培养基分离计数等方法针对棉隆(30 g/m2)、氰氨化钙(120 g/m2)和威百亩(30 mL/m2)在生菜(Lactuca sativa)种植土壤内对镰孢菌的抑制效果和土壤微生物群落的影响进行研究,生菜收获期测定植株农艺性状和产量,结合土壤理化性质开展熏蒸剂与土壤微生物互作相关分析.结果表明,棉隆、氰
生长激素(growth hormone,GH)是垂体分泌的多肽,在硬骨鱼类的发育和体细胞的生长过程中具有重要的调节作用.为探究生长激素在斑鳢(Channa maculata)雌、雄生长差异中的作用及其与性激素的相互作用机制,本研究克隆了斑鳢GH基因(GenBank No.MW574005)序列,分析了其表达模式及对外源性类固醇激素的响应.结果表明,斑鳢GH基因cDNA序列全长882 bp,开放阅读框(ORF)为639 bp,共编码212个氨基酸.斑鳢GH基因序列长1604 bp,含有5个外显子和4个内含子
松耦合变压器是实现无线电能传输的核心部件,是保证系统稳定性和可靠性的重要环节.在工作过程中变压器绕组和铁芯中会受到高频电磁力,可能导致发射线圈和接收线圈之间产生轴向或径向的位移,影响能量传输效率或造成结构破坏.以一种轴式松耦合旋转变压器为例,建立了磁路及电路模型并得出影响电磁力大小的因素.利用有限元仿真工具,模拟出正常工作情况下的磁场分布,并分析了同轴及发生轴向偏移时绕组及铁芯受到的电磁力,得出了该结构松耦合旋转变压器在力学方面的适用场景及进一步优化的方法.
计算机视觉技术是一项涵盖丰富内容的综合性技术,它以自身所具备的特点,在诸多领域中得到广泛应用。基于此,文章从计算机视觉技术研究现状介绍入手,分析了计算机视觉技术在相关领域中的具体应用,在此基础上展望了计算机视觉技术的发展趋势,期望能够对计算机视觉技术的推广普及有所帮助。
黄酮类化合物是植物体内重要的次生代谢产物,在植物生长发育和抵御逆境胁迫中均发挥着重要作用.木豆(Cajanus cajan)是一种生长在喀斯特地域高酸铝土壤的木本豆科先锋树种,富含多种类黄酮等次生代谢物.本研究针对鉴定类黄酮生物合成的关键通路,筛选和鉴定了木豆中8类关键酶基因家族,分别是苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)、肉桂酸4-羟化酶(cinnamic acid-4-hydroxylase,C4H)、4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate-CoA
家用典型负荷的特征分析和分类已成为智能用电领域的重点方向,从电路特性上解决家用典型负荷特征分析和分类方法问题,是基于多组家用电器实测波形,对电阻型、整流电子型和电机型三类典型家用负荷的电量波形特征进行分析,并提取功率因数、电流谐波总畸变率、50％电流幅值占比等参数构成组合负荷印记.利用决策树支持向量机(SVM)对家用典型负荷进行分类研究,并用300组典型负荷的实测负荷印记数据和单一功率因数数据对分类方法进行了验证,结果表明:所提负荷印记代表性强,分类方法准确率高达97.67％.先进行电器分类的判别方法,提
滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是一种重要的禽类致病性支原体,感染鸡(Gallus domesticus)和火鸡(Meleagris gallopavo)后引起渗出性滑膜炎、关节炎、跗跖部肿胀和呼吸道炎,造成养鸡业的重大经济损失.亚甲基四氢叶酸脱氢酶(methylenetetrahydrofolate dehydrogenase,MTHFD)催化5,10-亚甲基四氢叶酸生成5,10-甲炔基四氢叶酸,该酶是叶酸代谢中的关键酶,参与嘌呤核苷酸的合成.为研究滑液支原体MTHFD蛋白的免
创新是驱动发展的动力,社会各个行业的优质发展都需要不断创新,电气工程领域的发展也不例外.随着科技的发展,更多高性能且环保的材料走进电气工程领域.这些新材料的广泛使用,优化了电气产业结构,提高了电气的各种性能,有些还大幅降低了电气工程项目成本,推动了新技术在电力行业的运用,促进电气行业的可持续发展和创新.在材料的发展过程中,我们能够看到人类社会的历史进程,也能够预测未来新材料和相关新材料技术必将在电气行业中得到更广泛地应用.
现阶段,燃煤发电厂的烟气脱硫工艺主要为湿法脱硫,这种工艺会产生一定量的脱硫废水.文章介绍了脱硫废水的水质特性和处理流程,并针对膜法浓缩减量、蒸发浓缩结晶、主烟道蒸发和旁路烟道蒸发工艺等主流技术进行技术可行性分析以及经济性对比,对燃煤电厂脱硫废水零排放工艺的发展前景进行了展望.
鸭丙型肝炎病毒(Duck hepacivirus,DuHCV)是近年来从临床表现为产蛋异常鸭(Anas)群中新发现的一种丙型肝炎病毒.为建立DuHCV的分子生物学检测方法用于该病的流行病学调查并进一步探究其致病机制,本研究根据NCBI数据库中DuHCV参考株(HCL-2株,GenBank No.MK737640.1)的NS5B基因特征,设计特异性引物,建立检测DuHCV的TB Green实时荧光定量PCR方法.结果显示,建立的检测DuHCV的TB Green实时荧光定量PCR方法,灵敏度高,最低检测限为6