【摘 要】
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卵巢颗粒细胞凋亡影响动物卵泡发育及排卵过程,白藜芦醇在卵巢颗粒细胞凋亡过程中发挥重要作用.本研究旨在解析白藜芦醇介导miR-222调控猪卵巢颗粒细胞(porcine ovarian gran
【机 构】
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安徽农业大学动物科技学院/地方畜禽遗传资源保护与生物育种安徽省重点实验室,合肥230036
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卵巢颗粒细胞凋亡影响动物卵泡发育及排卵过程,白藜芦醇在卵巢颗粒细胞凋亡过程中发挥重要作用.本研究旨在解析白藜芦醇介导miR-222调控猪卵巢颗粒细胞(porcine ovarian granulosa cells,pGCs)凋亡的机制,为白藜芦醇在养猪生产中的应用提供理论支持.实验以不同浓度的白藜芦醇(0～100μmol/L)处理分离培养获得的原代pGCs,在倒置显微镜下观察pGCs形态变化,借助流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期分布,利用qRT-PCR检测细胞周期相关基因CyclinD、CyclinB、p21及miR-222的表达变化;并检测miR-222过表达状态下pGCs凋亡的变化.结果显示当白藜芦醇浓度达到100 μmol/L时,pGCs的形态发生改变,细胞增殖率显著下降,细胞周期进程被阻碍;miR-222的表达水平随白藜芦醇浓度的增加呈先下降后上升的趋势,75 μmol/L时为拐点(表达量最低);在75 μmol/L白藜芦醇处理的pGCs中过表达miR-222,pGCs凋亡率显著下降.以上结果表明白藜芦醇(100 μmol/L以下)可抑制pGCs增殖,并以浓度依赖的方式调控细胞中miR-222的表达;且在75 μmol/L白藜芦醇处理的pGCs中过表达miR-222,可降低细胞凋亡率.本研究结果为白藜芦醇协同miRNA调控pGCs的生物学功能提供了参考数据.
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