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目的:探讨特异性位点生物素化蛋白的制备技术.方法:采用分子克隆法,将编码Avi标签(AviTag)的基因序列插入真核表达载体,构建表达AviTag的gp120重组质粒,使融合蛋白羧基段带AviTag.采用生物素蛋白连接酶将活化生物素连接到融合蛋白的AviTag多肽位点,采用酶切、Western blot和ELISA等方法:分析制备是否成功.结果:酶切和Western blot证实gp120-AviTag表达载体构建和表达成功.ELISA结果显示生物素成功标记于融合蛋白的AviTag多肽位点.结论:将AviTag引入表达载体可成功制备特异性位点生物素化蛋白,为生发中心抗原特异性B细胞反应的研究提供技术支持.