【摘 要】
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目的 探讨微小RNA(miR)-27a靶向调控F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)对子宫颈癌细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响.方法 30例宫颈癌组织和癌旁组织、30例正常宫颈组织新鲜标本用于实验.R
【机 构】
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聊城市妇幼保健院妇产科,山东聊城252000;聊城市人民医院妇产科,山东聊城252000
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目的 探讨微小RNA(miR)-27a靶向调控F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)对子宫颈癌细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响.方法 30例宫颈癌组织和癌旁组织、30例正常宫颈组织新鲜标本用于实验.Real-time PCR检测宫颈癌、癌旁组织、正常宫颈组织以及宫颈癌细胞(SiHa、Caski、HeLa、HCC94)、子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8中miR-27a的表达.应用脂质体转染法将miR-27a抑制剂(inhibitor)及其阴性对照转染至SiHa细胞,CCK-8法、流式细胞术、Transwell法分别检测miR-27a对SiHa细胞增殖活性、细胞周期、凋亡率和侵袭能力的影响.生物学信息法预测miR-27a的靶向基因,双荧光素酶报告基因实验结合Western bloting验证miR-27a对FBXW7的靶向调控作用.结果 与癌旁组织和正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中miR-27a高表达(P＜0.05);与子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8相比,宫颈癌细胞SiHa、Caski、HeLa、HCC94中miR-27a高表达(P＜0.05).抑制SiHa细胞中miR-27a的表达,能够明显降低细胞的增殖活性(P＜0.05),提高G0/G1期细胞比例(P＜0.05),降低S期和G2/M期细胞比例(P＜0.05),提高细胞凋亡率(P＜0.05),抑制细胞的侵袭能力(P＜0.05).生物学信息法预测FBXW7可能是miR-27a的靶向调控基因;双荧光素酶报告基因实验显示,miR-27a可以与FBXW7基因的3'UTR区特异性结合(P＜0.05),并负调控FBXW7蛋白的表达(P＜0.05).结论 MiR-27a在宫颈癌的发生发展中起着癌基因的作用,抑制miR-27a表达能够明显抑制宫颈癌细胞的恶性生物学行为,其机制可能与靶向调控FBXW7的表达有关.
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