【摘 要】
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γ-聚谷氨酸(γ-PGA)是由L-谷氨酸和/或D-谷氨酸聚合而成的一种聚氨基酸,广泛应用于化妆品、医药等领域.高聚物单体的立体构型会影响产品性质和应用,因此调控γ-PGA中D-谷氨
【机 构】
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江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室 无锡214122;江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 无锡214122;江南大学药学院 无锡214122
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γ-聚谷氨酸(γ-PGA)是由L-谷氨酸和/或D-谷氨酸聚合而成的一种聚氨基酸,广泛应用于化妆品、医药等领域.高聚物单体的立体构型会影响产品性质和应用,因此调控γ-PGA中D-谷氨酸/L-谷氨酸单体比(D/L单体比)具有重要意义.前期以谷氨酸棒杆菌为底盘,表达来自于地衣芽孢杆菌的γ-PGA合成酶,合成以L-Glu(97.10％)为主的γ-PGA.通过外源添加不同浓度D-谷氨酸,合成了D-谷氨酸占比为15.71％～33.52％的γ-PGA.然后,在重组菌中表达来自于枯草芽孢杆菌的谷氨酸消旋酶,并使用三个不同强度RBS调控其表达水平,合成D-谷氨酸占比30.82％～34.59％的γ-PGA,但调控范围较窄.利用四个不同强度启动子调控谷氨酸消旋酶表达水平,扩大D/L单体比可调范围,合成D-Glu占比32.71％～52.53％的γ-PGA.提供一种理性调控γ-PGA的D/L单体比策略,实现了D-谷氨酸占比为2.90％～52.53％的γ-PGA的合成,为高效合成不同D/L单体比γ-PGA提供了基础.
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