【摘 要】
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根据裂殖酵母的β-葡萄糖苷酶的基因序列和酒精酵母菌表面展示质粒载体pYD1上的多克隆位点设计引物,从裂殖酵母中提取总RNA,然后反转录扩增得到β-葡萄糖苷酶基因(bglA),把该
【机 构】
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曲阜师范大学生命科学学院,南京林业大学江苏省制浆造纸科学与技术重点实验室
【基金项目】
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江苏省制浆造纸科学与技术重点实验室开放基金(200901);曲阜师范大学博士启动基金资助项目
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根据裂殖酵母的β-葡萄糖苷酶的基因序列和酒精酵母菌表面展示质粒载体pYD1上的多克隆位点设计引物,从裂殖酵母中提取总RNA,然后反转录扩增得到β-葡萄糖苷酶基因(bglA),把该基因连接到表面展示质粒载体pYD1上,成功构建了重组质粒pYD1-bglA,并转化用于表面展示的酵母EBY100菌株中,得到酵母转化子,提取酵母菌的DNA通过PCR扩增证实了β-葡萄糖苷酶基因已整合到酵母基因组中.以不含载体和含空载体的酵母菌为对照,加2%(w/v)的半乳糖诱导48 h后,利用免疫荧光法在荧光显微镜下检测到了来源于裂殖酵母的β-葡萄糖苷酶展示在酵母菌细胞表面,并对其酶学性质进行分析研究.
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