【摘 要】
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目的 探讨培哚普利对糖皮质激素(GCs)诱导的骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡及成骨分化的影响,并分析可能的机制.方法 将体外培养的MSCs分为5组:空白对照组、地塞米松组(DEX组,106 mol/L DEX)、培哚普利低、中、高剂量组(106 mol/L DEX溶液+0.01μmol/L培哚普利、106 mol/L DEX溶液+0.1μmol/L培哚普利、106 mol/L DEX溶液+1.0μmol/L培哚普利).运用MTT法、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡情况;通过实时荧光定量PCR法、免疫印迹
【机 构】
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遵义医科大学附属医院骨一科,贵州 遵义563000
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目的 探讨培哚普利对糖皮质激素(GCs)诱导的骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡及成骨分化的影响,并分析可能的机制.方法 将体外培养的MSCs分为5组:空白对照组、地塞米松组(DEX组,106 mol/L DEX)、培哚普利低、中、高剂量组(106 mol/L DEX溶液+0.01μmol/L培哚普利、106 mol/L DEX溶液+0.1μmol/L培哚普利、106 mol/L DEX溶液+1.0μmol/L培哚普利).运用MTT法、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡情况;通过实时荧光定量PCR法、免疫印迹法分别检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)及碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、骨桥蛋白(OPN)以及Notch通路配体(JAG1、JAG2)、跨膜受体蛋白(Notch1、Notch2)、下游靶基因(Hes1、Hey1)mRNA及其蛋白表达情况.结果 与空白对照组比较,DEX组MSCs增殖抑制率、凋亡率、Bcl-2、cleaved-caspase-3 mRNA及其蛋白表达升高,ALP、CollagenⅠ、OPN、Bax、JAG1、JAG2、Notch1、Notch2、Hes1、Hey1 mRNA及其蛋白表达降低(P<0.05);与DEX组比较,培哚普利低、中、高剂量组MSCs增殖抑制率、凋亡率、Bcl-2、cleaved-caspase-3 mRNA及其蛋白降低,ALP、CollagenⅠ、OPN、Bax、JAG1、JAG2、Notch1、Notch2、Hes1、Hey1 mRNA及其蛋白表达升高(P<0.05),呈剂量依赖性.结论 培哚普利能够抑制DEX诱导的MSCs凋亡,并促进成骨分化,机制可能与促进Notch通路活化有关.
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