【摘 要】
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目的：构建大容量易于改造成Diabody的噬菌体单链抗体库，筛选人源性抗体。方法：从正常成人外周血和新生儿脐血中分离淋巴细胞提取RNA，经RT-PCR扩增轻重链可变区基因（VL和VH），通过重叠
【机 构】
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海军总医院中心实验科,第四军医大学西京医院皮肤科
【基金项目】
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国家863计划(2001AA215361);博士后基金(2004)资助
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目的：构建大容量易于改造成Diabody的噬菌体单链抗体库，筛选人源性抗体。方法：从正常成人外周血和新生儿脐血中分离淋巴细胞提取RNA，经RT-PCR扩增轻重链可变区基因（VL和VH），通过重叠PCR（over-lap PCR）将VL和VH拼接成单链抗体（ScFv）基因（其中VH两侧是两个非同源的loxp基因），并克隆人噬菌体表达载体PDF，得到初级噬菌体抗体库。将初级抗体库以高MOI超感染Cre＋菌株BS1365，通过loxp-cre定位重组系统，介导轻重链在菌内重组配对，然后低感染XL1-Blue菌，
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