【摘 要】
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目的: 构建抗禽流感病毒(AIV)抗体Fab轻链库,以便进一步构建完整AIV噬菌体抗体库.方法: 采用RT-PCR技术, 从经禽流感灭活油乳剂疫苗免疫的罗曼蛋鸡的外周血淋巴细胞中扩增抗A
【机 构】
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重庆工学院生物工程学院,西南农业大学动物科技学院,重庆市农业局
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目的: 构建抗禽流感病毒(AIV)抗体Fab轻链库,以便进一步构建完整AIV噬菌体抗体库.方法: 采用RT-PCR技术, 从经禽流感灭活油乳剂疫苗免疫的罗曼蛋鸡的外周血淋巴细胞中扩增抗AIV抗体轻链基因, 将扩增的抗体轻链基因与载体PComb3HSS连接后, 电转化入大肠杆菌XLI-Blue, 克隆筛选重组抗体Fab轻链基因的质粒, 并进行酶切鉴定和序列分析.结果: 扩增的AIV抗体轻链基因片段的大小约为617 bp. 经克隆筛选鉴定和序列分析证明, 获得抗AIV抗体轻链库, 该轻链库库容量为2.5×106, 轻链基因的重组率为50%.结论: 构建了库容量为2.5×106的抗AIV抗体轻链基因库, 为下一步构建鸡抗AIV噬菌体抗体库和筛选特异性的AIV Fab抗体奠定基础.
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