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目的
评估蚕丝蛋白(SFSs)体外负载兔内皮祖细胞(EPCs)和脂肪干细胞(ADSCs)构建复合移植物后，植入糖尿病兔模型体内评估移植物新生血管的形成，探讨其促进糖尿病环境下血流重建的可行性。
方法体外分离、培养和扩增EPCs，通过Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-Ac-LDL)和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的荆豆凝集素(FITC-UEA-1)染色的直接免疫荧光法进行鉴定；体外获取和扩增ADSCs，通过流式细胞术进行鉴定；利用SFSs负载扩增的EPCs和ADSCs作为实验组(n＝24)，复合物进行7 d的培养后植入糖尿病兔模型体内，以单纯SFSs负载ADSCs为对照组(n＝24)。分别于8、16周处死兔并获取上述移植物，通过组织学方法对血管的再生情况进行评估。
结果成功获取并扩增种子细胞，免疫荧光鉴定和流式细胞术证实为EPCs和ADSCs。兔ADSCs表达间叶干细胞特异性抗原CD105(96.39%)、CD44(94.73%)和CD73(97.19%)，而不表达造血干细胞表面标志物CD34(0.97%)和CD45(2.91%)。SFSs负载种子细胞后，种子细胞增殖良好，苏木素-伊红(HE)染色显示种子细胞广泛的附着于SFSs表面，提示SFSs未对细胞产生毒性作用。在8周和16周时间点，所有兔均存活，组织学切片镜下显示实验组移植物可见显著的新生血管形成，对照组不明显(P<0.05)。
结论SFSs负载EPCs和ADSCs为促进糖尿病环境下的泌尿系组织工程移植物的血流重建提供了实验基础。