【摘 要】
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目的 研究低氧状态下乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)对胰腺癌高转移细胞株MIA PaCa-2细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9的影响.方法 以Hpa AS-ODN预先阻断MIA PaCa-2细胞Hpa表达并低氧培养,观察MMP-2、
【机 构】
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264000烟台,青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆胰外科,264000烟台,青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆胰外科,264000烟台,青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆胰外科,264000烟
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目的 研究低氧状态下乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)对胰腺癌高转移细胞株MIA PaCa-2细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9的影响.方法 以Hpa AS-ODN预先阻断MIA PaCa-2细胞Hpa表达并低氧培养,观察MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达的变化,明胶酶法检测MMP-2和MMP-9活性的变化,观察阻断Hpa对MMP-2和MMP-9表达及活性的影响.结果 低氧培养条件下,MIA PaCa-2细胞MMP-2 mRNA及蛋白表达略有上调,但是与常氧条件下培养对比,在6、12和24 h差异均无统计学意义(P值均＞0.05).以ASODN阻断Hpa后,MMP-2 mRNA及蛋白表达均无明显变化.低氧后6 h MMP-9 mRNA及蛋白表达开始升高,12 h(P ＜0.05)和24 h(P ＜0.01)更加明显.阻断Hpa表达后,MMP-9 mRNA及蛋白表达在各时间段均有下降,而在24 h下降明显,差异具有统计学意义(P＜0.01).低氧后12h和24h,活化型的MMP-2和MMP-9均显著增强,当Hpa表达被抑制后,于12h(P ＜0.01)和24h(P＜0.01)活化型的MMP-9活性受到明显抑制,而各时间内,活化型的MMP-2活性均不受Hpa AS-ODN的影响(P＞0.05).结论 低氧可刺激MIA PaCa-2细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达,增强酶活性.预先阻断Hpa表达在12h和24h可抑制MMP-9 mRNA和蛋白的表达,降低MMP-9的活性,而对MMP-2则无明显影响。
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