【摘 要】
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目的:探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡的影响,以及HIF-1α、P-ERK1/2、iN-OS蛋白表达变化在其中的作用与意义。方法:体外培养大鼠PASMC,设计常氧组、低氧组及AD
【机 构】
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郴州市第一人民医院呼吸内科,湖南省老年医院、湖南省老年医学研究所呼吸病研究室,南华大学药理研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No30270581);湖南省教育厅重点科研基金资助项目(No02A047);湖南省自然科学基金资助项目(No99JJY20033)
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目的:探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡的影响,以及HIF-1α、P-ERK1/2、iN-OS蛋白表达变化在其中的作用与意义。方法:体外培养大鼠PASMC,设计常氧组、低氧组及ADM、L-NAME、PD98059干预组,用MTT比色法和PCNA的免疫组化法测定细胞增殖反应,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用West-ern blotting法检测HIF-1α、P-ERK1/2、iNOS的蛋白表达。结果:(1)低氧24h组的A值明显高于常氧组(P<0.01),而PD98059及ADM干预组明显低于低氧组(P<0.01),L-NAME干预组明显高于低氧组和常氧组(P<0.01)。(2)免疫组化表明,低氧24h组呈阳性表达(P<0.01)。PD98059、ADM抑制了PCNA的表达(P<0.01),L-NAME促进了PCNA的表达(P<0.01)。(3)各组在低氧培养24h后,凋亡指数差异无显著(均P>0.05)。(4)Western blotting表明常氧组少量HIF-1α、iNOS、P-ERK1/2表达,低氧4h后均表达增高(P<0.01),8h仍维持在高峰(P<0.01),而HIF-1α、P-ERK1/2在低氧24h后表达下调。L-NAME促进了HIF-1α表达(P<0.01),PD98059部分抑制了HIF-1α、iNOS及P-ERK1/2表达(P<0.01);ADM部分抑制了HIF-1α表达,促进iNOS表达(P<0.01)。结论:低氧能促进肺动脉平滑肌细胞增殖,对细胞的凋亡无影响;HIF-1在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞增殖中起重要作用。
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