【摘 要】
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目的:研究人IL-17的体外生物学活性.方法:采用RT-PCR的方法克隆得到了hIL-17基因序列.将测序正确的人IL-17基因装入PQE3.0原核表达载体构建重组载体hIL-17/PQE3.0.该重组载体
【机 构】
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苏州大学生命科学学院生物技术研究所,苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室,苏州大学附属第一医院附属第一医院血液学研究所
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目的:研究人IL-17的体外生物学活性.方法:采用RT-PCR的方法克隆得到了hIL-17基因序列.将测序正确的人IL-17基因装入PQE3.0原核表达载体构建重组载体hIL-17/PQE3.0.该重组载体导入宿主菌M15, 经异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生IL-17/His融合蛋白, 并经Western blot实验确认.结果:原核表达的hIL-17/His重组蛋白经变性、复性后, 利用HiTrapTM亲和层析得到纯品蛋白.体外活性实验表明, 该融合蛋白具有刺激人宫颈癌细胞株HeLa分泌IL-6和GM-CSF的作用.结论:制备了具有生物学活性的IL-17/His重组蛋白, 为进一步研究该分子在自身免疫疾病等方面的作用奠定了基础.
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