【摘 要】
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[目的]研究thapsigargin(TG)对体外培养的人晶状体上皮细胞系SRA01/04增殖的影响,并探讨其分子机制.[方法]不同浓度TG处理SRA01/04细胞72 h,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖;
【机 构】
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眼科学国家重点实验室//中山大学中山眼科中心,贵州省人民医院
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[目的]研究thapsigargin(TG)对体外培养的人晶状体上皮细胞系SRA01/04增殖的影响,并探讨其分子机制.[方法]不同浓度TG处理SRA01/04细胞72 h,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖;流式细胞仪(PI法)检测细胞周期改变;透射电镜观察细胞超微结构变化;TUNEL法检测细胞核中DNA的断裂情况;激光共焦显微镜和流式细胞仪检测Caspase3活性亚单位(17/19 ku)的表达及阳性细胞表达率.[结果]MTT法测得TG为0.325～5 μmol/L时,细胞增殖抑制率变化显著,IC50大约为0.8 μmol/L;透射电镜显示TG处理SRA01/04细胞膜皱缩,染色体浓缩、边集、核膜裂解、凋亡小体形成;流式细胞仪(PI法)及TUNEL法检测TG浓度为0,0.1,0.5,1,10 μmol/L分别处理SRA01/04细胞72 h,细胞凋亡率随浓度的增加而增加,呈浓度依赖性;TG处理后细胞Caspase3阳性表达率也呈浓度依赖性增加,TG为10 μmol/L时,几乎每个细胞浆内Caspase3都被激活.[结论]Thapsigargin可能通过激活Caspase3为诱导体外培养的人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞凋亡而抑制其增殖,TG为预防后发性白内障的药物研究提供了基础.
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