【摘 要】
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为了培育耐盐水稻品种,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在水稻品种东农427的耐盐负调控基因OsEIL1和OsEIL2设计1个敲除靶点对其进行同时敲除.通过PCR和测序的方法,在T0共检测出
【机 构】
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东北农业大学 寒地粮食作物种质创新与生理生态教育部重点实验室,黑龙江 哈尔滨 150030
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为了培育耐盐水稻品种,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在水稻品种东农427的耐盐负调控基因OsEIL1和OsEIL2设计1个敲除靶点对其进行同时敲除.通过PCR和测序的方法,在T0共检测出了5个突变单株,其中有1株为双基因同时突变的植株.在该植株的T1株系中,获得了4株双基因纯合突变且不含T-DNA元件插入的植株.在T2进行苗期耐盐性鉴定,成熟期考察农艺性状指标.结果表明,在苗期200 mmol/L NaCl溶液处理5 d后,突变体植株的鲜质量和干质量显著高于野生型植株,地上部及地下部钠离子含量均显著低于野生型植株,钾离子含量与野生型植株无明显差异.恢复7 d后,突变体植株幼苗存活率(75.0%)显著高于野生型植株(8.3%).在成熟期,突变体的主要农艺性状未发生明显变化.综上,利用CRISPR/Cas9技术对水稻品种东农427进行了耐盐改良,为耐盐水稻品种的培育提供了理论和材料基础.
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