【摘 要】
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目的研究特异性dsRNA对小鼠ES细胞中对核外基因和核内染色体基因的干扰作用,并对RNA干扰(RNAi)技术在皮肤病基因治疗领域中应用的可能性进行初步探讨.方法选择荧光蛋白基因为
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院皮肤科,Thomas
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目的研究特异性dsRNA对小鼠ES细胞中对核外基因和核内染色体基因的干扰作用,并对RNA干扰(RNAi)技术在皮肤病基因治疗领域中应用的可能性进行初步探讨.方法选择荧光蛋白基因为靶基因,通过质粒或RNA直接转染技术,将荧光蛋白双链RNA(dsRNA-EGFP)转染小鼠胚胎干细胞(ES细胞),从而观察该细胞中特异性RNAi作用.并通过皮肤局部注射dsRNA-EGFP和局部外用脂质体包裹的dsRNA-EGFP,观察EGFP转基因鼠皮肤EGFP的表达.结果无论是转染质粒产生的dsRNA-EGFP或是直接转染的d8RNA-EGFP,均明显抑制ES细胞核外或染色体中EGFP基因的特异性表达.局部皮肤注射或皮肤外用脂质体-dsRNA-EGFP均特异性抑制EGFP转基因鼠皮肤EGFP的表达.结论本研究证实了小鼠ES细胞中特异性RNAi的作用.
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