【摘 要】
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目的研究丙咪嗪对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮屏障功能的保护作用，并探讨可能机制。方法32只雄性SPF级Balb/c小鼠随机数字法分为4组(健康对照组、丙咪嗪组、LPS组、LPS＋丙咪嗪组)。采用LPS(20 mg/kg)腹腔注射建立小鼠ALI模型，并在腹腔注射LPS前30 min给予丙咪嗪(25 mg/kg)干预，处死前10 min，给予尾静脉注射FITC-FD4，12
【机 构】
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目的研究丙咪嗪对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮屏障功能的保护作用，并探讨可能机制。
方法32只雄性SPF级Balb/c小鼠随机数字法分为4组(健康对照组、丙咪嗪组、LPS组、LPS＋丙咪嗪组)。采用LPS(20 mg/kg)腹腔注射建立小鼠ALI模型，并在腹腔注射LPS前30 min给予丙咪嗪(25 mg/kg)干预，处死前10 min，给予尾静脉注射FITC-FD4，12 h后麻醉下放血处死小鼠，随后取出支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织。常规HE染色观察肺组织病理变化及病理学评分；肺组织湿/干比(W/D)和BALF/血清FD4比值的测定分别评估肺水肿和肺泡上皮细胞通透性；采用real-time PCR、Western blot和免疫组织化学方法检测不同组紧密连接蛋白Occludin、Claudin-4和ZO-1的表达情况。数据分析采用SPSS 16.0软件，多组间的均数比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。
结果LPS＋Imipramine组小鼠病理评分(9.22±0.21)较LPS组(11.23±0.55)降低，差异具有统计学意义(P<0.05)；LPS＋Imipramine组肺组织湿/干比小于LPS组，差异具有统计学意义(P<0.05)；LPS＋Imipramine组较LPS组相比，BALF/血清FD4比值下降差异具有统计学意义(P<0.05)；方差分析结果显示，4组之间的Occludin、Claudin-4、ZO-1蛋白mRNA及蛋白表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05)，组间两两比较发现与LPS组相比，LPS＋Imipramine组小鼠肺各紧密连接蛋白mRNA及蛋白的表达水平均升高(均P<0.05)；免疫组织化学结果显示，紧密连接蛋白Occludin、Claudin-4主要位于肺泡上皮细胞膜，ZO-1主要位于肺泡上皮细胞胞浆内，在健康对照组和丙咪嗪组蛋白表达明显，LPS组蛋白表达较健康对照组均降低(均P<0.05)，LPS＋Imipramine组较LPS组蛋白表达均上升(均P<0.05)。
结论丙咪嗪可通过上调肺泡上皮细胞紧密连接蛋白的表达增强肺泡上皮细胞屏障功能，进而保护LPS诱导的小鼠ALI。
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