【摘 要】
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目的探讨CCL20–CCR6–Th17轴在肝细胞癌血管浸润转移中的作用。方法采用SYBR Green实时定量PCR测定人肝细胞系L–02、肝细胞癌细胞系Hep3B、Huh7和HepG2中CCL20 mRNA的表达，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中CCL20蛋白的分泌，Transwell迁移实验检测肝细胞癌细胞系对人外周血单个核细胞的趋化作用。采用ELISA定量检测93例肝细胞癌患者(转
【机 构】
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510182广州医科大学基础学院,中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院腹部外科,中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室,中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院腹部外科,中国医学科学
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目的探讨CCL20–CCR6–Th17轴在肝细胞癌血管浸润转移中的作用。
方法采用SYBR Green实时定量PCR测定人肝细胞系L–02、肝细胞癌细胞系Hep3B、Huh7和HepG2中CCL20 mRNA的表达，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中CCL20蛋白的分泌，Transwell迁移实验检测肝细胞癌细胞系对人外周血单个核细胞的趋化作用。采用ELISA定量检测93例肝细胞癌患者(转移组51例，无转移组42例)术前外周血中白细胞介素1α(IL–1α)、IL–1β、IL–6、IL–8、IL–10、IL–17、IL–23、γ–干扰素、肿瘤坏死因子α和CCL20的水平，采用SYBR Green RT–PCR检测41例肝细胞癌癌组织及其相应的癌旁组织中CCL20和CCR6的表达水平，免疫组织化学染色检测肝细胞癌及其对应的癌旁组织和正常人供肝组织中CCL20的表达水平。
结果人肝细胞癌细胞系中CCL20的表达水平高于正常肝细胞，对外周血表达CCR6的T细胞具有趋化作用。93例肝细胞癌患者血清中CCL20蛋白的表达水平为(38.2±28.4)pg/ml，高于肝血管瘤患者[(7.8±17.8)pg/ml, P<0.01]。肝细胞癌患者血清中CCL20蛋白的表达水平与肿瘤直径呈正相关(r＝0.32，P＝0.0018)。41例肝细胞癌组织CCL20 mRNA的表达水平高于癌旁组织(P<0.05)，CCL20蛋白主要在肝细胞癌细胞质中表达，某些浸润的免疫细胞也有一定程度表达。多因素分析结果显示，血清中IL–17和CCL20水平是影响肝细胞癌患者发生血管浸润转移的独立影响因素(均P<0.05)。41例肝细胞癌患者癌组织及对应的癌旁组织中CCL20 mRNA的表达水平与肝细胞癌发生血管浸润转移均无关(均P>0.05)。在发生血管浸润转移患者的癌组织及其对应的癌旁组织中CCR6 mRNA的表达水平分别为5.75(1.79，19.13)和7.99(4.49，19.54)，均高于未发生血管浸润转移的患者[分别为1.69 (0.76，2.87)和3.58 (1.84，4.32)]，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论CCL20/CCR6/Th17轴可能促进肝细胞癌的血管浸润转移。
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