可表达随机12肽库的逆转录病毒初级文库构建方法的建立及其实验参数的优化

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lingshi185
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目的建立可表达随机12肽库的逆转录病毒初级文库的构建方法并优化其实验参数。方法体外合成可编码随机12肽的DNA片段。将该DNA片段克隆入带有EGFP标记的逆转录病毒载体pQCX—IX—EGFP,连接产物电击转化大肠杆菌,转化所得菌液即为可表达随机12肽库的逆转录病毒初级文库,其间通过大量的实验优化:插入片段与载体的摩尔比、连接反应的条件、连接产物的DNA浓度以及电击转化参数等关键的实验参数。结果按照本研究所确立的方法和最佳实验参数构建的可表达随机12肽库的逆转录病毒初级文库的滴度为2.85×10
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