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目的实现HIV-2ROD gp105-gag截短体重组蛋白tgp105-gag的高效分泌表达,对其表达条件进行研究. 方法用PCR方法获得HIV-2ROD tgp105截短基因,将其与HIV-2ROD gag构建HIV-2ROD tgp105-gag嵌合基因并克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌型表达载体pPIC9中,转化GS115酵母菌,经MD/MM表型筛选、PCR扩增筛选阳性克隆,以甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE分析及Western blot证实. 结果 HIV-2ROD tgp105-gag嵌合截短基因在Pichia pastoris酵母系统中获得了有效分泌表达,相对分子质量(Mr)约为140×103,表达量约为16%,表达产物可被HIV-2阳性血清识别.最佳表达条件是大于85%的溶解氧,摇瓶转速240r/min,1.0%～1.5%甲醇诱导,培养时间3?d. 结论在Pichia pastoris表达系统中实现了HIV-2ROD tgp105-gag蛋白的有效分泌性表达,表达产物具有良好的抗原特异性.