目的建立一种基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定血清甲基丙二酸(MMA)的方法,可用于人群维生素B12营养状况的评估。初步探讨了148份健康妊娠期孕妇血清中MMA的分布情况。方法以氘代甲基丙二酸(d3-MMA)为内标,超滤管(3 k Da)离心14 000 g×30 min去除蛋白,用液相色谱串联质谱分离测定滤液,同位素内标法定量。结果方法线性范围10~1000 nmo L/L,标准曲线相关系数R2=0.998,定量限10 nmo L/L,批内变异系数≤3.0%,批间变异系数≤4.9%,回收率96.9%~107.5%。样本可常温条件下保存6 h,4℃冷藏1周,-70℃冷冻90 d。健康体检孕妇(23~40岁)MMA测定值中位数为247 nmo L/L(82~996 nmo L/L),孕晚期MMA测定平均值(355.45±111.31 nmo L/L)与孕早期、孕中期均值(234.73±149.81 nmo L/L、267.18±152.66 nmo L/L)差异有统计学意义(P<0.01)。结论建立了UPLC-MS/MS测定血清MMA方法。标本前处理简便快速,方法灵敏度高,特异性强,可用于维生素B12缺乏人群的早期诊断和营养干预效果监测。