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目的:构建、制备单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)糖蛋白B DNA疫苗,检测其诱导机体产生的细胞免疫应答.方法:PCR扩增编码HSV-Ⅰ gB去除N端部分信号肽序列(39 bp)的基因片段(2 673 bp),定向插入pcDNA3载体中,构建pcDNA3-gB基因疫苗并对其进行PCR、酶切及测序鉴定.于BALB/c小鼠注射免疫3次,观察小鼠CD4+、CD8+T细胞亚群的变化,CFSE/PI双标记的流式细胞计数法检测CTL活性.结果:双酶切分析结果为目的基因(2.7 kb)和线性质粒pcDNA3(5.4 kb)