【摘 要】
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根据Magainin Ⅱ氨基酸序列,选用大肠杆菌偏爱密码子,化学合成了2个DNA片段,利用重叠区互补PCR法得到Magainin Ⅱ的基因序列。构建了融合表达载体pET21b-Magainin Ⅱ,转化大
【机 构】
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中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所,衡水学院生命科学系,中国科学院动物研究所动物生态与保护生物学院重点实验室
【基金项目】
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中国科学院绿色农业技术集成与发展中心创新方向项目（Y029891134）
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根据Magainin Ⅱ氨基酸序列,选用大肠杆菌偏爱密码子,化学合成了2个DNA片段,利用重叠区互补PCR法得到Magainin Ⅱ的基因序列。构建了融合表达载体pET21b-Magainin Ⅱ,转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析,在5.1 kD处可见目的蛋白条带,经Western blot检测表明成功地在大肠杆菌中表达了融合蛋白。诱导温度在20℃,IPTG终浓度为0.4 mmol/L,诱导时间为12 h,融合蛋白表达效果较好,且主要以可溶性形式存
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