【摘 要】
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目的 研究依达拉奉(EDA)对过氧化氢(H2O2)诱导的成骨细胞氧化应激损伤的影响,为骨质疏松的治疗提供依据.方法 取24 h内新生SD大鼠头盖骨进行成骨细胞原代培养,传代至第3代进
【机 构】
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天津医科大学朱宪彝纪念医院、天津市内分泌研究所、卫健委激素与发育重点实验室、天津市代谢性疾病重点实验室,天津300134;锦州医科大学医疗学院
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目的 研究依达拉奉(EDA)对过氧化氢(H2O2)诱导的成骨细胞氧化应激损伤的影响,为骨质疏松的治疗提供依据.方法 取24 h内新生SD大鼠头盖骨进行成骨细胞原代培养,传代至第3代进行成骨细胞鉴定.将鉴定后的成骨细胞分别用H2O2或(和)EDA以不同浓度作用2、4、6h进行MTT法检测细胞增殖情况;选择合适的作用浓度和作用时间进行H2O2诱导成骨细胞氧化损伤模型的建立,测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、碱性磷酸酶(ALP)等指标,分析EDA对H2O2诱导成骨细胞氧化应激损伤的影响.同时通过免疫印迹法测定药物处理分组后bax,bcl-2凋亡相关蛋白的变化.用SPSS 23.0软件进行方差分析.结果 400 μmol/L H2O2作用4h是建立成骨细胞氧化应激模型的适宜浓度和作用时间.MTT显示,不同浓度(10、20、40、80 μmol/L)EDA作用2、4、6h成骨细胞成活率均高于空白组,差异均有统计学意义(P＜0.05).EDA(80 μmol/L)+H2O2(400 μmol/L)组较H2O2(400 μmol/L)组成骨细胞成活率高,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞氧化结果显示,MDA浓度随EDA浓度增加而逐渐下降,SOD活性则逐渐升高,均有统计学意义(P＜0.05).EDA(80 μmol/L)+H2O2(400 μmol/L)组ALP水平高于H2O2组,差异有统计学意义(P＜0.01).western blot显示,EDA(10、20、40、80 μmol/L)+H2O2(400 μmol/L)组bcl-2表达增强,bax表达递减,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EDA对H2O2诱导的成骨细胞氧化应激损伤具有保护作用,可以减少损伤后成骨细胞的氧化和凋亡.
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