【摘 要】
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目的探讨雌二醇在子宫内膜癌Ishikawa细胞中是否通过丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）介导核因子κB （NF-κB）通路产生细胞因子，及其对细胞增殖及迁移的影响。 方法Western blot法检测雌二醇作用Ishikawa细胞后AKT活化情况，以及AKT和ER抑制剂对雌二醇活化AKT的影响，TransAM NF-κB p65检测不同浓度雌二醇及1×10-6 mol/L雌二醇作用不同时间后的NF-
【机 构】
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目的探讨雌二醇在子宫内膜癌Ishikawa细胞中是否通过丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）介导核因子κB （NF-κB）通路产生细胞因子，及其对细胞增殖及迁移的影响。
方法Western blot法检测雌二醇作用Ishikawa细胞后AKT活化情况，以及AKT和ER抑制剂对雌二醇活化AKT的影响，TransAM NF-κB p65检测不同浓度雌二醇及1×10-6 mol/L雌二醇作用不同时间后的NF-κB活性水平。经雌二醇(雌二醇组)、ER抑制剂(ER组)、AKT抑制剂(AKT组)和NF-κB抑制剂(NF-κB组)分别预处理Ishikawa细胞后，采用荧光定量PCR检测细胞内血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）mRNA表达，Western blot法检测VEGF、bFGF蛋白的变化，流式细胞仪检测细胞周期的变化，羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）法检测细胞增殖能力，Transwell检测细胞迁移能力。
结果Western blot检测结果显示，雌二醇、AKT和ER抑制剂作用Ishikawa细胞后AKT活性水平分别为0.090±0.075、0.013±0.036、0.042±0.008，对照组为0.053±0.036；雌二醇组的AKT活性值比对照组、ER组及AKT组升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)。TransAM检测显示，雌二醇浓度为1×10-6mol/L时，Ishikawa细胞NF-κB活性为0.77±0.20，较对照组（0.51±0.16）明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05)；1×10-6mol/L雌二醇作用30 min及1 h时，Ishikawa细胞NF-κB活性水平最高 (P＜0.05)。AKT组NF-κB活性为0.54±0.27，低于1×10-6mol/L雌二醇组(P＜0.05)。雌二醇组VEGF、bFGF mRNA的表达分别为6.34±0.45和1.58±0.12，明显高于对照组的0.83±0.03和0.34±0.02(均P＜0.01)；雌二醇组VEGF、bFGF蛋白的表达均明显高于对照组、ER组、AKT组和NF-κB组 (均P＜0.05)。雌二醇作用Ishikawa细胞后，细胞增殖数明显增多，G0/G1期比例明显低于对照组(均P＜0.01)。
结论雌二醇可能经AKT激活NF-κB通路产生VEGF和bFG因子，促进Ishikawa细胞的增殖与迁移能力。
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