【摘 要】
：
对传统的根癌农杆菌冻融法转化条件进行优化,研究了根癌农杆菌EHA105和LBA4404的菌株生长状态、CaCl2浓度、质粒加入量、二甲基亚砜(DMSO)、聚乙二醇(PEG4000)对质粒pBI121-C
【机 构】
：
中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京,210009
论文部分内容阅读
对传统的根癌农杆菌冻融法转化条件进行优化,研究了根癌农杆菌EHA105和LBA4404的菌株生长状态、CaCl2浓度、质粒加入量、二甲基亚砜(DMSO)、聚乙二醇(PEG4000)对质粒pBI121-Ctube转化根癌农杆菌EHA105和LBA4404的影响.结果表明:EHA105比LBA4404更容易接受外源质粒,两株农杆菌在Ca2+浓度为0.06 mol/L时,感受态转化能力最佳.OD600分别为0.5和0.4时,EHA105和LBA4404的转化效率较高.10 μg的pBI121-Ctube质粒会降低转化率.低浓度的DMSO和PEG4000均可以提高转化率,浓度过高会抑制农杆菌转化甚至产生毒害作用.在初步优化的感受态细胞中,添加DMSO和PEG4000(4％)的EHA105和LBA4404感受态细胞,转化率比没有DMSO和PEG4000制备的最佳农杆菌感受态细胞转化效率增加了28.6和22.3倍(P＜0.01),结果表明该法比传统的优化效果更加有效.“,”An efficient and stable freeze-thaw Agrobacterium tumefaciens (A.tumefaciens) transformation method was described in this paper.Between the two different strains tested in our research,EHA105 took pBI121-Ctube vector more easily than EHA105.Competent cells were prepared in CaCl2 solution with the optimal concentration 0.06mol/L.The best density ( OD600 ) range of competent cells preparation for EHA105 was 0.5,and for LBA4404 was 0.4.Low concentration (2％,4％,8％ ) of dimethyl sulfoxide( DMSO)or polyethyleneglycol 4000 (PEG4000) increased transformation efficiency significantly.Modified freeze-thaw transformation with DMSO and PEG4000 ( both 4％ ) increased the transformation efficiency 28.6 fold for EHA105 and 22.3 fold for LBA4404 compared with that without DMSO and PEG4000 (P ＜ 0.05 ).
其他文献
为发掘库拉索芦荟中的内生真菌资源,从云南元江野生样本中共分离到内生真菌318株,并从中筛选得到1株具有广谱抗菌能力的菌株F80。通过其形态特征、生理生化特性及ITS序列的同
中图分类号：G841 文献标识：A 文章编号：1009-9328（2017）07-000-01 摘 要 在素质教育的环境中，各学校注重学生的德、智、体、美、劳全面发展，中等职业学校也不例外。中职学校的篮球教学是提升学生身体素质和心理素质的重要课程之一，因此，在中职篮球教学过程中应及时发现问题，并针对问题进行改进，促进学生身体素质和心理素质更好的发展。 关键词 中等职业学校 篮球教学 现状 改进
为筛选并建立小鼠体外有效的Th17分化,比较并建立3个小鼠Th17细胞体外分化模型:ICR移植排斥Th17细胞分化模型,MOG抗原肽诱导Th17细胞分化模型以及非抗原特异性Th17细胞分化模
中图分类号：G807 文献标识：A 文章编号：1009-9328（2017）07-000-01 摘 要 通过运用问卷调查法、数理统计法、访谈法、文献资料法等研究方法，对河南教育学院体育学院2014—2016届社会体育专业和体育教育专业共计376毕业生进行了调查研究，分析影响就业的种种因素，帮助体育专业毕业生了解目前体育专业的就业形势。从而为提高体育专毕业生的就业率作参考。 关键词 近3年 河南
黄芪甲苷(Astragaloside IV,ASI)是药材黄芪中的活性成分之一.由于目前对于黄芪皂苷代谢途径知之甚少,使得通过直接转入皂苷母核合成相关基因从而提高黄芪毛状根中黄芪甲苷含
中图分类号：G807 文献标识：A 文章编号：1009-9328（2017）07-000-01 摘 要 自20世纪80年代以来，教师知识已成为世界各国教师教育研究领域越来越关注的热门话题，教师知识一词也成了使用频率较高的词汇之一。由于教师教学活动的多变性，研究者选取研究问题的角度不同以及人的认识能力有限，目前对教师知识这个概念的定义还未形成共识， 本文将对体育教师的知识结构进行具体分析。 关键
探讨本院2009年1月到2012年2月铜绿假单胞菌的临床分布情况及耐药性特点,为临床合理用药提供依据.选取本院2009年1月到2012年2月分离出的152株铜绿假单胞菌,用法国梅里埃全自
蒽醌是一类广泛存在于药用植物中,具有多种药理活性的化合物,但其肝、肾毒性使它的成药性受到很大限制。为了确保含蒽醌类化合物中药临床应用的安全性和有效性,研究人员通过
中图分类号：G822 文献标识：A 文章编号：1009-9328（2017）07-000-01 摘 要 短跑项目作为田径的一个重要类别，以其内容全面性、历史影响久远性、项目易操作性、时间需求少等特点在学校体育教学中占有很大比例。本文以银川市市区高中生短跑项目开展情况为研究对象，通过问卷调查和结构式访谈对银川市市区一中、二中、六中、九中、唐中、田家炳中学及实验中学的高中生进行随机抽样调查，通过对银
对新截短侧耳素类化合物S3抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resisitant Staphylococcus aureus,MRSA)的活性进行研究.体外活性试验采用琼脂二倍稀释法测定最低抑菌