【摘 要】
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目的制备一种基于免疫荧光技术的微流控芯片,用于降钙素原(PCT)的高灵敏度定量检测,评价其临床应用价值。方法按照检测需求绘制图纸,注塑模具,选择高透光率聚苯乙烯(PS)加工
【机 构】
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汕头大学医学院附属肿瘤医院,山西医科大学医学影像学系
【基金项目】
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广东省医学科学技术研究基金资助项目(A2015503);广东省自然科学基金资助项目(2015A030310487);天津市重点研发计划科技支撑重点项目(17YFZCSY00660);天津市企业博士后创新项目择优资助计划(TJQYBSH2017012)
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目的制备一种基于免疫荧光技术的微流控芯片,用于降钙素原(PCT)的高灵敏度定量检测,评价其临床应用价值。方法按照检测需求绘制图纸,注塑模具,选择高透光率聚苯乙烯(PS)加工芯片上板,PS均匀掺杂钛白粉后加工芯片下板;捕获抗体(PCT1#)标记荧光微球后固定在微球区,检测抗体(PCT2#)和质控抗体(羊抗鼠Ig G)分别包被在检测区(T区)和质控区(C区);超声键合后在荧光定量分析仪上用标准芯片绘制标准曲线,测试血清样本。结果可实现芯片批量加工,荧光微球粒径为1.75μm,激发和发射波长为Ex/Em:640/660 nm,标记抗体后有0.497μm的抗体层,C区和T区抗体牢固包被,200μl血清样本在芯片中总流动时间为10 min,其中反应7 min,洗涤3 min,C区质控均匀,T区有明显的浓度梯度相关性荧光强度变化。结论基于免疫荧光技术的微流控芯片可实现PCT的高灵敏度定量检测,具有重要的临床意义和指导价值。
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