【摘 要】
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纺锤体检验点(spindle checkpoint)是一个重要的细胞分裂生化调节通路,可监督染色体正确分离和传代.着丝粒相关蛋白E(centromere-associated protein E,CENP-E)是一个分子量
【机 构】
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安徽医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室;安徽医科大学第一附属医院麻醉科;安徽医科大学病原生物学教研室;中国科学技术大学细胞动力学实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.30801329);安徽医科大学博士科研资助项目(No.0108023101)~~
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纺锤体检验点(spindle checkpoint)是一个重要的细胞分裂生化调节通路,可监督染色体正确分离和传代.着丝粒相关蛋白E(centromere-associated protein E,CENP-E)是一个分子量为312kD的微管马达驱动蛋白,可以衔接纺锤体微管与动点并参与纺锤体检验点调控.为研究CENP-E的作用机理,以其动点结合区域为诱饵蛋白,用酵母双杂交技术从人HeLa细胞cDNA文库中筛选出了Nuf2蛋白.体外的pull-down实验和体内的免疫共沉淀实验表明,Nuf2蛋白通过其卷曲螺旋(coiled-coil)功能域特异结合CENP-E的C末端区域,间接免疫荧光显示Nuf2与CENP-E共定位于细胞有丝分裂期染色体的动点.由此推论,CENP-E通过Nuf2的直接作用参与构筑动点-微管界面,进而参与细胞有丝分裂纺锤体检验点信号转导通路,为染色体正确分离发挥调控作用.
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