探讨乙型肝炎病毒X基因（HBx）转染人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞后对其表达Notch1信号的影响，并观察Notch1信号在HBx介导的肾小管上皮细胞免疫活性中的作用。
方法用分子克隆的方法构建pcDNA3.1/myc-HBx质粒及pcDNA3.1/myc-Notch1质粒，转染HK-2细胞，并应用短发卡RNA（shRNA）沉默Notch1基因表达。将细胞分为7组：①正常培养组；②转染HBx空载质粒组；③转染HBx质粒组；④转染HBx质粒+Notch1空载质粒组；⑤转染HBx质粒+Notch1质粒组；⑥转染HBx质粒+Notch1 shRNA空载质粒组；⑦转染HBx质粒+Notch1 shRNA沉默质粒组。实时定量PCR和蛋白印迹法检测细胞中Notch1受体的变化，流式细胞术检测细胞表面人主要组织相容性复合物（MHC）-Ⅱ、CD40表达的变化，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清中白细胞介素（IL）-4、干扰素（IFN）-γ水平。
结果HK-2细胞经转染HBx基因后，可高表达HBx，Notch1 shRNA在HK-2细胞中的转染效率也高达70%，基因沉默有效；转染HBx基因组细胞Notch1水平高于正常培养组及转染HBx空载质粒组相比，且Notch1过表达组细胞表面MHC-Ⅱ、CD40表达均明显高于Notch1空载质粒组（9.69%±0.52%比4.90%±0.32%，21.56%±0.71%比15.74%±0.20%，均P<0.05），其上清液中IL-4水平亦高于Notch1空载质粒组（50.2±0.6比28.1±1.2，P<0.05），而IFN-γ水平较低（11.9±1.7比18.8±0.8，P<0.05）。Notch1基因沉默后上述指标结果呈相反变化。
结论HBx基因转染H K-2细胞后可引起Notch1表达上调； Notch1又可促进细胞表面免疫分子的表达，并调控细胞因子分泌，最终导致细胞损伤及免疫微环境的紊乱。