【摘 要】
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目的 为了探索经济、高效的腺病毒的纯化工艺,采用阴离子交换层析和分子筛层析两步法对H3亚型流感重组腺病毒pacAd-H3-EHA-H1HA1 new进行纯化,并评价纯化效果. 方法 利用7L生
【机 构】
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吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130122;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春,130122;吉林大学动物医学学院,吉林长春130062
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目的 为了探索经济、高效的腺病毒的纯化工艺,采用阴离子交换层析和分子筛层析两步法对H3亚型流感重组腺病毒pacAd-H3-EHA-H1HA1 new进行纯化,并评价纯化效果. 方法 利用7L生物反应器培养HEK-293细胞,用于对H3型流感重组腺病毒进行扩增;利用冻融的方法使病毒从细胞中释放,通过阴离子交换层析和分子筛层析法纯化病毒,用分光光度计检测纯化样品的纯度,并测定病毒的滴度和回收率. 结果 纯化后的样品经PCR鉴定正确,纯化前后的病毒滴度分别为5.6×109 TCID50/ml和1.1×1010 TCID50/ml,纯化后样品纯度(A260/A280值)分别为2.01和1.26,阴离子交换层析纯化的回收率为31.5％,分子筛层析纯化的回收率为81.4％,总回收率为25.6％. 结论 利用阴离子交换层析和分子筛层析两步法纯化H3亚型流感重组腺病毒的回收率和滴度高,该方法可用于重组腺病毒的纯化.
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