乳果糖对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响

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目的

评价乳果糖对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响。

方法

选择胃管置入成功的健康雄性清洁级SD大鼠144只,3月龄,体重300~350 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=36):假手术组(S组)、脊髓缺血再灌注组(I/R组)、乳果糖组(L组)和乳果糖+抗生素组(LA组)。采用阻断胸主动脉联合体循环低血压的方法诱导脊髓缺血9 min,然后恢复灌注,建立脊髓缺血再灌注损伤模型。L组于再灌注即刻胃内灌注乳果糖0.5 g/kg。LA组于术前1~3 d胃内灌注甲硝唑和庆大霉素,每日单次剂量分别为30和40 mg/kg,3次/d,余处理同L组。于缺血前、再灌注10、30、60、90、120、150和180 min时采用氢气探针测定脑脊液氢气浓度。于再灌注12、24和48 h时,采用Western blot法测定脊髓核因子E2相关因子-2(Nrf2)表达水平,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,钼酸铵法测定过氧化氢酶(CAT)活性,ELISA法测定脊髓8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)、3-硝基酪氨酸(3-NT)和丙二醛(MDA)的含量。于再灌注48 h时行后肢神经行为学评分,然后处死大鼠,取L3-5脊髓组织,测定神经元存活率和凋亡率。

结果

与S组比较,I/R组再灌注各时点脑脊液氢气浓度差异无统计学意义,再灌注12、24和48 h时脊髓Nrf2、CAT和SOD水平差异无统计学意义(P>0.05),8-OHdG、3-NT、MDA含量增加,后肢神经行为学评分和神经元存活率降低,神经元凋亡率升高,L组再灌注30~180 min时脑脊液氢气浓度升高,再灌注12、24和48 h时脊髓Nrf2、CAT和SOD水平增加(P<0.05),8-OHdG、3-NT、MDA含量、后肢神经行为学评分、神经元存活率和凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。与I/R组比较,L组再灌注30~180 min时脑脊液氢气浓度升高,脊髓Nrf2、CAT和SOD水平增加,8-OHdG、3-NT和MDA含量降低,后肢神经行为学评分和神经元存活率升高,神经元凋亡率降低(P<0.05),LA组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。

结论

乳果糖可减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤。

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