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目的
研究人γ-GCS催化亚单位(GCLC)基因转录起始位点上游-810~-769 bp调控区的功能及转录调控元件。
方法克隆人GCLC基因调控区片段,构建野生型质粒。缺失突变-770~-766间的GATAAG核苷酸及定点突变-765,-764的GC为TA,-755,-754的GG为TA,构建突变型表达质粒。通过质粒转染表达方法研究转录调控功能,EMSA+super-shift方法鉴定GCLC基因转录起始位点上游-810~-769 bp的转录调控元件。
结果人GCLC基因始位点上游-810~-769 bp为正性调控区,这一区间有NF-κB、AP-2转录调控元件,转录因子AP-2能抑制转录因子NF-κB对人GCLC基因转录起始位点上游-790~-766 DNA序列的结合。
结论人GCLC基因转录调控区转录起始位点上游-810~-769 bp为新发现的正性调控区,其内存在NF-κB、AP-2调控元件。