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目的
探讨微RNA(miR)-203在七氟醚抑制肺癌A549细胞侵袭和迁移中的作用及其机制。
方法以2%、4%和6%七氟醚处理A549细胞4 h后,采用Transwell小室实验检测细胞的侵袭和迁移能力,RT-PCR检测细胞中miR-203的表达。生物信息学软件预测和双荧光素酶报告基因实验检测miR-203和BCAT1的靶向关系。采用脂质体法转染miR-203抑制剂或pcDNA3.1-BCAT1过表达载体质粒后,RT-PCR检测miR-203的表达,免疫印迹检测BCAT1蛋白的表达,Transwell小室实验观察下调miR-203或上调BCAT1表达对七氟醚处理的A549细胞侵袭和迁移的影响。
结果七氟醚能够呈浓度依赖性抑制A549细胞侵袭和迁移,并促进miR-203的表达。双荧光素酶报告基因实验证实BCAT1是miR-203的靶基因。下调miR-203表达可逆转七氟醚对A549细胞侵袭和迁移的抑制作用,并上调BCAT1蛋白的表达;同时上调BCAT1表达可逆转七氟醚对A549细胞侵袭和迁移的抑制作用。
结论miR-203参与七氟醚抑制肺癌A549细胞侵袭和迁移的作用,其作用机制可能与靶向抑制BCAT1的表达有关。