【摘 要】
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目的:建立rCPM36在大肠杆菌中的表达体系,纯化表达产物并检测其抗原性.方法:运用PCR方法从禽多杀性巴氏杆菌国际标准株P1059基因组中扩增出编码36kDa成熟黏附蛋白的cpm36基因
【机 构】
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吉首大学生物资源与环境科学学院省部共建生物工程实验室,新疆大学生命科学与技术学院,新疆大学化学化工学院
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目的:建立rCPM36在大肠杆菌中的表达体系,纯化表达产物并检测其抗原性.方法:运用PCR方法从禽多杀性巴氏杆菌国际标准株P1059基因组中扩增出编码36kDa成熟黏附蛋白的cpm36基因,构建原核表达载体pQE30-cpm36,转化到大肠杆菌M15中并诱导表达目的蛋白,用镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白及制备其抗体,Western blot分析其抗原性.结果:SDS-PAGE结果显示目标蛋白以可溶性形式表达在大肠杆菌M15细胞质中,其相对分子质量为37kDa,Western blot结果表明表达蛋白具有良好的抗原性.结论:成功构建出原核表达载体并实现了目的蛋白表达,用镍离子螯合层析柱纯化得到具有抗原性的蛋白,为进一步开展禽多杀性巴氏杆菌黏附因子和保护性抗原的研究奠定基础.
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