【摘 要】
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目的 利用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR定性检验鼠疫样本材料,分析实验结果的差异.方法 选取鼠疫菌质粒上的毒力基因caf1及染色体上的标识序列YP-LC为靶序列设计引物,利用SYBR G
【机 构】
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青海省地方病预防控制所,西宁811602
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目的 利用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR定性检验鼠疫样本材料,分析实验结果的差异.方法 选取鼠疫菌质粒上的毒力基因caf1及染色体上的标识序列YP-LC为靶序列设计引物,利用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术定性检测鼠疫样本,通过统计软件SPSS 21.0分析不同引物、不同浓度的模板DNA,Ct值的差异.结果 SYBR Green Ⅰ 荧光定量PCR定性检测感染不同浓度的鼠疫耶尔森菌的脏器材料,感染浓度越大,Ct值越小(t=26.817、27.782,P =0.003、0.005,均＜0.05),不同引物、不同脏器组织之间Ct值差异无统计学意义(t =28.828、25.242,P = 0.714、0.132,均＞0.05),但以caf1为引物对应的Ct值较以YP-LC为引物对应的Ct值重现性好,数据稳定.结论 不同脏器之间,肝脏的Ct值较脾脏的Ct值数据稳定,重现性好.不同引物之间,以fra为引物的Ct值较以YP-LC为引物的Ct值重现性好,数据稳定.
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