目的 探讨耳廓及关节来源软骨细胞构建组织工程软骨的差异.方法 分离培养健康长枫杂交猪耳廓、关节来源软骨细胞及骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs),分别以软骨细胞单独接种或与BMSCs 1∶1混合接种聚羟基乙酸/聚乳酸(Polyglycolic acid/Polylactic acid,PGA/PLA)支架2种模式构建组织工程软骨.针对每种构建模式按软骨细胞来源随机分为4组,每组4例样本,分别为耳廓软骨细胞组、关节软骨细胞组、耳廓软骨细胞+ BMSCs 1∶1共培养组、关节软骨细胞+ BMSCs 1∶1共培养组.于体外培养8周、裸鼠皮下植入6周后分别取材进行大体观察,比较单独培养或共培养构建过程中4组样本的组织厚度和湿重,HE、番红O、Ⅱ型胶原免疫组化和丽春红/维多利亚蓝染色比较软骨组织形成情况,Real-time PCR检测软骨相关基因的表达,采用两组独立样本t检验进行统计学分析.结果 体外培养8周,各组均能形成软骨样结构,只有耳廓软骨细胞+ BMSCs组可见少量弹性纤维分泌;单独应用关节软骨细胞构建的组织工程软骨厚度为(3.12±0.24) mm,较耳廓软骨细胞组平均增厚38.1％ (P ＜0.05),关节软骨细胞+BMSCs 1∶1共培养构建的组织工程软骨厚度为(2.41±0.21) mm,较耳廓软骨细胞+BMSCs组平均增厚19.3％ (P ＜0.05);体内重塑6周后,耳廓软骨细胞组及耳廓软骨细胞+BMSCs组均可见大量弹性纤维,关节软骨细胞组及关节软骨细胞+ BMSCs组均形成了典型的透明软骨结构并发生了骨化,X型胶原和MMP13的表达水平均显著上调(P＜0.05).因此体内重塑6周后,耳廓软骨细胞单独培养或与BMSCs共培养均可形成弹性软骨结构,关节软骨细胞单独培养或与BMSCs共培养可形成透明软骨结构.结论 应用不同组织来源软骨细胞构建的组织工程软骨,回植体内环境后可重塑相应来源的组织学特征。
猪耳廓及关节来源软骨细胞构建组织工程软骨的实验研究
【摘 要】
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目的 探讨耳廓及关节来源软骨细胞构建组织工程软骨的差异.方法 分离培养健康长枫杂交猪耳廓、关节来源软骨细胞及骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs),分别以软骨细胞单独接种或与BMSCs 1∶1混合接种聚羟基乙酸/聚乳酸(Polyglycolic acid/Polylactic acid,PGA/PLA)支架2种模式构建组织工程软骨.针
【机 构】
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100144北京,中国医学科学院整形外科医院研究中心,100144北京,中国医学科学院整形外科医院研究中心,100144北京,中国医学科学院整形外科医院研究中心,100144北京,中国医学科学院整形外
【出 处】
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中华整形外科杂志
【发表日期】
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2014年30期
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