【摘 要】
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alpha-突触核蛋白(alpha-synuclein,α-syn)异常累积与聚集是帕金森病的重要致病因素之一.目前,已有的降低细胞内α-syn的方法多是从抑制新蛋白质合成角度进行,而无法干预已经存在并产生毒性的蛋白质.该研究旨在探索一种可以降解α-syn的新方法,从而挽救α-syn造成的细胞损伤.本研究依据Trim-Away方法设计了2种针对α-syn降解的肽段,即Pep1和Pep2,并将其过表达至HEK293T以及SH-SY5Y细胞中.Western印迹检测和免疫荧光分析以及免疫共沉淀结果表明,Pep
【机 构】
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首都医科大学基础医学院神经生物学系,北京100069
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alpha-突触核蛋白(alpha-synuclein,α-syn)异常累积与聚集是帕金森病的重要致病因素之一.目前,已有的降低细胞内α-syn的方法多是从抑制新蛋白质合成角度进行,而无法干预已经存在并产生毒性的蛋白质.该研究旨在探索一种可以降解α-syn的新方法,从而挽救α-syn造成的细胞损伤.本研究依据Trim-Away方法设计了2种针对α-syn降解的肽段,即Pep1和Pep2,并将其过表达至HEK293T以及SH-SY5Y细胞中.Western印迹检测和免疫荧光分析以及免疫共沉淀结果表明,Pep1和Pep2可以在上述细胞系中表达,并与α-syn形成复合物,协助胞内蛋白酶体系统降解α-syn (P＜0.05,P＜0.0001).进一步的细胞活力以及细胞毒性结果显示,Pep1和Pep2可以挽救α-syn引起的细胞活力的下降(P＜0.0001),并且可以缓解α-syn造成的细胞毒性的增加(P＜0.0001).总之,本文的结果提示,肽段可以协助胞内蛋白酶体系统降解α-syn,并缓解α-syn造成的细胞损伤.本研究为短肽的研发、应用以及帕金森病的干预提供新的思路.
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