【摘 要】
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目的 评估梅毒螺旋体TP15抗原在梅毒血清学诊断中的应用价值.方法 聚合酶链式反应(PCR)扩增获得梅毒螺旋体TP15基因片段,构建TP15基因的原核表达载体,SDS-PAGE检测TP15蛋白表达水平,Ni-NTA亲和层析法纯化TP15蛋白,Western blot鉴定其免疫反应性;使用TP15重组蛋白建立间接酶联免疫吸附试验(ELISA),检测44份梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)阳性血清和44份TPPA阴性血清,评价TP15-ELISA与TPPA的符合率.结果 PCR扩增获得约0.5 kb的基因片段
【机 构】
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510120 广州医科大学附属第一医院输血科
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目的 评估梅毒螺旋体TP15抗原在梅毒血清学诊断中的应用价值.方法 聚合酶链式反应(PCR)扩增获得梅毒螺旋体TP15基因片段,构建TP15基因的原核表达载体,SDS-PAGE检测TP15蛋白表达水平,Ni-NTA亲和层析法纯化TP15蛋白,Western blot鉴定其免疫反应性;使用TP15重组蛋白建立间接酶联免疫吸附试验(ELISA),检测44份梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)阳性血清和44份TPPA阴性血清,评价TP15-ELISA与TPPA的符合率.结果 PCR扩增获得约0.5 kb的基因片段.成功构建了原核表达载体pET28b-TP15.TP15在大肠杆菌中以包涵体形式表达,分子量约20 kDa.Western blot结果表明TP15蛋白能够与梅毒TPPA阳性血清发生特异性反应,与TPPA阴性血清不发生反应.TPPA与TP15-ELISA检测梅毒特异性抗体的符合率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 TP15抗原在梅毒血清学诊断中具有潜在的临床应用价值.
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